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近紅外光譜技術(shù)測(cè)定粳稻品種的直鏈淀粉含量

來(lái)源: http://www.hostingz.cn  類別:實(shí)用技術(shù)  更新時(shí)間:2015-03-24  閱讀

  直鏈淀粉含量是決定稻米品質(zhì)和口感的重要因素,也是培育優(yōu)質(zhì)食用稻米的重要指標(biāo)。早期低代快速無(wú)損預(yù)測(cè)和后期高代大批量、快速、精確測(cè)定直鏈淀粉含量是水稻育種中的重要工作,可以顯著提高育種工作效率。因傳統(tǒng)的直鏈淀粉含量測(cè)定采用碘比色法,其操作復(fù)雜、速度慢、藥品消耗量大,且樣品被粉碎,難以滿足育種的需要。

  20世紀(jì)80年代以來(lái),隨著近紅外光譜(NIRS)技術(shù)的迅速發(fā)展,有關(guān)學(xué)者將近紅外光譜分析技術(shù)應(yīng)用于農(nóng)業(yè)科學(xué)研究,但多側(cè)重于理論和方法的探討。對(duì)較大批量樣本的粳稻稻谷、糙米、精米、糙米粉和精米粉等樣品進(jìn)行了近紅外光譜分析,所得結(jié)果既能滿足粳稻品種低代選擇小樣本、無(wú)損傷測(cè)定的需要,也能滿足高代大批量樣本的測(cè)定,現(xiàn)將有關(guān)結(jié)果報(bào)道如下。

  1試驗(yàn)材料和方法

  1.1供試材料

  供試材料為216份常規(guī)粳稻(含糯稻35份),樣品的含水率≤12.0%。光譜掃描前,將光譜儀室的溫度調(diào)節(jié)至25℃,樣品置于光譜儀室平衡一晝夜,確保樣品環(huán)境條件與近紅外儀一致。

  1.2測(cè)試方法

  1.2.1樣品直鏈淀粉含量的化學(xué)值測(cè)定

  稱取0.1g左右的精米粉樣品,先加入加1mL95%酒精浸潤(rùn)后再加9mL1mol/L的KOH溶液放入30e恒溫箱一晝夜后,用日本BRAN-LUEBBE公司生產(chǎn)的全自動(dòng)直鏈淀粉分析儀測(cè)定(以稻米直鏈淀粉含量為“0”的糯稻品種“神樂(lè)糯”樣品和已知直鏈淀粉含量的標(biāo)準(zhǔn)樣品而作出“標(biāo)準(zhǔn)曲線”)。

  1.2.2樣品NIR光譜獲取

  采用具有積分球、PbS檢測(cè)器、旋轉(zhuǎn)樣品池等裝置的德國(guó)BrukerFT-NIR近紅外光譜儀(Vector22/N-I),儀器由OPUS/IR掃描程序控制。

  以鍍金的漫反射體作參比(每5個(gè)樣品掃描一次參比),樣品杯為帶石英窗的圓形小杯,直徑4.5cm,高5.0cm,每次裝樣量以石英窗不漏光為度。工作譜區(qū)選用3498.4~10001.6cm-1,分辨率采用8cm-1,每隔2nm采集反射強(qiáng)度,重復(fù)掃描64次,取平均值,貯存于1個(gè)計(jì)算機(jī)文件,形成一條反射光譜。每樣品重復(fù)裝樣掃描兩次,取平均值,計(jì)算機(jī)自動(dòng)將反射光譜信息轉(zhuǎn)換成吸光度值貯存,然后在OPUS建模軟件上計(jì)算分析試驗(yàn)數(shù)據(jù)。

  1.2.3建模

  所有樣品的近紅外光譜采集后,用Bruker公司的OPUS定量分析軟件包分析。先預(yù)設(shè)譜區(qū)范圍3498.4~10001.6cm-1,再進(jìn)行光譜預(yù)處理比較。光譜預(yù)處理方法為:不處理、矢量歸一化、多元散射校正、一階導(dǎo)數(shù)、二階導(dǎo)數(shù)、一階導(dǎo)數(shù)+矢量歸一化、一階導(dǎo)數(shù)+多元散射校正等11種。并使用自動(dòng)優(yōu)化功能對(duì)每組進(jìn)行優(yōu)化,選出最佳譜區(qū)、最佳預(yù)處理方法和最佳主成分維數(shù)。在自動(dòng)優(yōu)化過(guò)程中,每一種預(yù)處理進(jìn)行31次譜區(qū)組合,通過(guò)內(nèi)部交叉證實(shí)給出交叉檢驗(yàn)均方誤差(RMSECV)和主成分維數(shù),從中選擇最優(yōu)譜區(qū)、預(yù)處理方法和主成分維數(shù),再進(jìn)行內(nèi)部交叉驗(yàn)證(步長(zhǎng)為1)。通過(guò)比較預(yù)測(cè)值和化學(xué)值的符合程度(用決定系數(shù)R2和RMSECV表示)評(píng)價(jià)直鏈淀粉含量的數(shù)學(xué)模型預(yù)測(cè)效果。

  采用偏最小二乘法(PLS)建立水稻直鏈淀粉含量數(shù)學(xué)模型,用內(nèi)部交叉證實(shí)法檢驗(yàn)定標(biāo)方程的預(yù)測(cè)效果,用已知化學(xué)值的10個(gè)樣品來(lái)檢驗(yàn)預(yù)測(cè)模型,最后得到最佳近紅外光譜預(yù)測(cè)模型。

  3討論與結(jié)論

  水稻生產(chǎn)在我國(guó)的農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中具有極其重要的戰(zhàn)略地位,隨著人們物質(zhì)生活水平的提高,對(duì)水稻的品質(zhì)提出了更高的要求。直鏈淀粉含量是影響稻米品質(zhì)的至關(guān)重要因素,在水稻育種中如何高效地進(jìn)行有目的的選擇,需借助于快速簡(jiǎn)便的分析技術(shù),本研究借助近紅外技術(shù)建立的回歸預(yù)測(cè)模型可以用作水稻直鏈淀粉含量的快速測(cè)定,為稻米直鏈淀粉含量的選擇性育種提供了技術(shù)支持。

  對(duì)同一批樣品的稻谷、糙米、精米、糙米粉、精米粉建立了近紅外回歸預(yù)測(cè)模型,除了稻谷的預(yù)測(cè)模型校正決定系數(shù)明顯低于0.90外,糙米預(yù)測(cè)模型的校正決定系數(shù)為0.8864,交叉檢驗(yàn)均方誤差為2.56,因此也能滿足早代選擇既不損傷種子的生命力,又能快速測(cè)定的要求,具有一定的實(shí)用性。糙米粉、精米粉預(yù)測(cè)模型的校正決定系數(shù)均大于0.90,說(shuō)明這兩種掃描樣品均可用于直鏈淀粉含量測(cè)定,由于這兩種方法都要損傷種子的生命力,因此可根據(jù)需要選擇應(yīng)用。

  稻米直鏈淀粉含量的近紅外建模表明,樣品的均一性與否,對(duì)模型的精度影響較大。掃描的結(jié)果表明稻谷的掃描重復(fù)性較差,同一樣品光譜間的擬合度低,而精米粉的掃描重復(fù)性較好,重復(fù)掃描間高度擬合。

  直鏈淀粉含量的近紅外分析結(jié)果與化學(xué)值有高度的相關(guān)性,但由于粳稻品種資源在低直鏈淀粉區(qū)域品種較少,所以建模樣品中直鏈淀粉含量在3.0%~17.0%之間的品種較少,這對(duì)進(jìn)一步提高模型的精度有一定的影響。進(jìn)一步收集此類指標(biāo)的樣品,可以提高模型的精度和預(yù)測(cè)的正確性。

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